Tên đề tài luận án: “Nghiên cứu đặc tính của chitinase tự nhiên và biểu hiện chitinase tái tổ hợp từ chủng nấm Lecanicillium lecanii”.

Chuyên ngành: Hóa sinh học

Mã số: 62.42.01.16

Họ tên nghiên cứu sinh: Nguyễn Hữu Quân

Khóa đào tạo: 2010-2014

Người hướng dẫn khoa học: 

1. PGS.TS. Quyền Đình Thi

2. PGS.TS. Nguyễn Vũ Thanh Thanh

Đơn vị đào tạo: Trường Đại học Khoa học

Cơ sở đào tạo: Đại học Thái Nguyên

NHỮNG KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU MỚI CỦA LUẬN ÁN

1. Luận án đã tìm ra phương pháp tinh sạch, đánh giá một số tính chất lý hóa của Exochitinase từ chủng nấm Lecanicillium lecanii 43H và chứng minh được khả năng ức chế sự phát triển của nấm Fusarium oxysporum và Rhizoctonia solani. Luận án bước đầu đánh giá được khả năng diệt được rệp của bào tử nấm L. lecanii.

2. Luận án là công trình nghiên cứu có hệ thống từ khâu phân lập, tách dòng, biểu hiện gen chitinase và đánh giá khả năng diệt rệp hại cây trồng. Cụ thể là: (i) Gen Chit từ chủng nấmL. lecanii 43H được phân lập, tách dòng thành công và xác định được trình tự nucleotide; đoạn gen Chit được đăng kí trong GenBank với mã số JX665045. (ii) Biểu hiện thành công gen Chit mã hóa endochitinase thuộc họ 18 glycosyl hydrolase trong nấm men P. pastoris X33 cho hoạt tính cao. Tinh sạch được chitinase tái tổ hợp và đánh giá được một số tính chất lý hóa cơ bản. (iii) Chứng minh được rChit có khả năng làm suy giảm lớp vỏ chitin của rệp.

KHẢ NĂNG ỨNG DỤNG TRONG THỰC TIỄN VÀ NHỮNG VẤN ĐỀ CÒN BỎ NGỎ CẦN TIẾP TỤC NGHIÊN CỨU

* Khả năng ứng dụng:

- Kết quả đánh giá toàn diện từ khâu lựa chọn điều kiện sinh tổng hợp chitinase, tinh sạch và xác định tính chất lý hóa, khả năng diệt nấm bệnh và rệp của chitinase, cũng như quá trình nhân dòng và biểu hiện gen mã hóa chitinase làm căn cứ để đánh giá và ứng dụng của chitinase với bào tử nấm trong quá trình tạo chế phẩm sinh học diệt rệp của chủng nấm L. lecanii. 

* Những vấn đề còn bỏ ngỏ cần tiếp tục nghiên cứu:

- Tiến hành thử nghiệm hoạt tính của phức hợp chitinase (exochitinase và endochitinase) và bào tử chủng nấm L. lecanii 43H lên rệp nhằm nghiên cứu xác định điều kiện tối ưu cho quá trình diệt rệp phục vụ sản xuất chế phẩm sinh học diệt côn trùng.

INFORMATION OF DOCTORAL DISSERTATION

Dissertation tittle: “Research of chitinase properties and expression chitinase recombinant from Lecanicillium lecanii fungus”.

Speciality: Biochemistry

Code: 62.42.01.16

PhD. Candidate: Nguyen Huu Quan

Training Course: 2010 - 2014

Supervisors:

1. Assoc. Prof. Quyen Dinh Thi,  Ph.D

2. Assoc. Prof. Nguyen Vu Thanh Thanh,  Ph.D

Training Institution: College of Sciences, Thainguyen University

THE NEW SCIENTIFIC FINDINGS

1. Purified exochitinase from Lecanicillium lecanii 43H was evaluated to have some physical and chemical properties proven to inhibit the growth of Fusarium oxysporum and Rhizoctonia solani fungus and it was initially proven its ability to kill bugs of
L. lecanii spores.

2. The dissertation research was systemized from the isolation, cloning, gene expression and evaluation of chitinase and the ability to kill aphids on plants. Specifically: (i) Chit Gene from  L. lecanii 43H was isolated, cloned and successfully identified the nucleotide sequences; Chit gene registered in GenBank with JX665045 code. (ii) successfully gene expressed encoding endochitinase of 18 glycosyl hydrolase in P. pastoris X33 yeasts for high activity. Purifying chitinase and recombinanating and evaluating some basic physicochemical properties. (iii) I was demonstrated that rChit was likely to degrade chitin shells of aphids.

PRACTICAL APPLICABILITY AND THE NEEDS FOR FURTHER STUDIES

* Practical applicability:

- The results of a comprehensive review of the selection conditions chitinase synthesizing, purifying and determining the physical and chemical properties, the ability to kill fungus and bugs of chitinase, as well as the cloning and expression of the gene encoding chitinase as a basis for evaluation and application of chitinase with fungal spores in the process of creating bugs kill probiotics strains of L. lecanii.

* Opening issues for further studies:

- It is necessary to conduct testing of complexed activity of chitinase (exochitinase and endochitnase) and spores from L. lecanii 43H strains to bugs in order to determine the optimal conditions for the process of killing bugs for production of bio-products for insect removal.